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Le bananier est une des plantes
de grande culture les plus multipliées "in vitro".
On parle de micropropagation ou de production de vitroplants. Un vitroplant
est un plant obtenu en laboratoire, par culture de tissus ou même
de cellules isolées provenant d'un "plant-mère"
considéré comme reproductible à cause de ses qualités.
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Le point de départ de la multiplication
in vitro, c'est-à-dire de la micropropagation, est le même
que celui utilisé dans d'autres modes de multiplication végétative
du bananier : c'est le bulbe (celui d'un rejet par exemple). Il est riche
de tissus jeunes, en pleine croissance, et donc de cellules en cours de
division, plus aptes à se multiplier que d'autres. Image bananier-30469 |
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Le bulbe du bananier, source de cellules prêtes
à se multiplier, est d'abord soigneusement débarrassé
de tous les tissus plus âgés moins aptes à subir les
manipulations qu'exige la culture in vitro. Image bananier-30470 |
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C'est au coeur du bulbe du bananier qu'on va
prélever des tissus jeunes et sains. Image bananier-30471 |
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L'extraction des tissus à haut potentiel
de croissance se fait généralement dans la partie centrale
du bulbe, en son sommet. C'est là que ces tissus sont présents
et en pleine activité ; ils seront les plus aptes à proliférer.
Image bananier-30472 |
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Le sommet du bulbe est isolé et soigneusement
inspecté pour évaluer son état général
qui doit être évidemment très sain. On en extraira
la partie centrale qu'on appelle l'"explant". Image bananier-30473 |
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L' "explant" est un volume de tissus
composé d'une infinité de cellules ; il contient tout le
potentiel de la multiplication in vitro et donc de la micropropagation
du bananier. Image bananier-30476 |
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L'explant est soumis à la désinfection
car le milieu sur lequel ses cellules seront cultivées est favorable
à la prolifération des microorganismes nuisibles ; il s'agit
donc d'en éliminer les germes. L'eau distillée, l'alcool
et l'eau de javel sont utilisés. Image bananier-30478 |
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Les concentrations d'agents désinfectants
dans les bains de lavage ont été testées afin de
ne pas être destructrices pour l'"explant" lui-même.
Image bananier-30480 |
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Un traitement très habituel fait intervenir
l'eau de Javel qui, à certaines concentrations préalablement
testées, sert de bain désinfectant pour l'explant. Image bananier-30481 |
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Toutes les opérations se font en milieu
aseptisé. La table à flux laminaire permet des manipulations
sous flux d'air désinfecté par filtrage constant. Image bananier-30468 |
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Le matériel végétal prélevé
et désinfecté est découpé en très petits
morceaux sous flux laminaire. Image bananier-30486 |
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Les récipients et le substrat prêts
à recevoir sur un milieu ad hoc (gel nutritif) les fragments de
matériel végétal sont eux-mêmes stérilisés
habituellement dans un "autoclave" où la chaleur joue
un rôle aseptisant. Image bananier-2150 |
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Les fragments de matériel végétal
désinfectés sont placés dans les récipients
stériles (tubes à essai par exemple). Ils contiennent un
milieu de culture lui-même aseptisé. Ils doivent être
rebouchés par un capuchon qui n'empêche pas la pénétration
de l'air utile à la respiration des cellules. Le tout est réalisé
dans une atmosphère stérile, sous flux laminaire. Les instruments
sont stérilisés à la flamme d'une lampe à
alcool. Image bananier-30492 |
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Dans le milieu de culture, des substances de
croissance ont été introduites : cytokinines et auxines.
Ce sont ces mêmes substances qui, dans la nature, provoquent la
différenciation des tissus : bourgeonnement, croissance, floraison,
etc. Image bananier-i-315 |
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L'explant, placé sur un milieu de culture
approprié, peut produire un "cal", amas de cellules indifférenciées,
proliférant sur lui-même et donc capable de fournir par fragmentation
des cals de seconde génération et de générations
ultérieures. Les cellules sont toujours indifférenciées
si la balance des substances de croissance au sein du milieu de culture
est maintenue dans ce but. Le cal devient ainsi la source d'une multiplication
très importante de ce matériau de base. Image bananier-cal01 |
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Dans le cal, chaque cellule de l'explant est
totipotente, c'est-à dire-que, revenue à une sorte d'état
juvénile, elle est désormais capable non seulement de se
multiplier telle qu'elle est (indifférenciée) ou, au contraire,
si l'on adapte la balance cytokinines/auxines, de s'orienter vers la production
de feuilles, de racines ou d'autres organes. Image bananier-cal02 |
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Les fragments de cal, cette fois, sont placés
dans des récipients contenant un milieu de culture dont la balance
(cytokinines/auxines) est ménagée en fonction du but à
atteindre : soit la prolifération de cellules, soit la différenciation
en tissus organisés. Image bananier-30492 |
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Les cals fragmentés sont cultivés
pour proliférer en laboratoire dans des conditions de température,
d'humidité et d'éclairement, définies par l'expérimentation.
Image bananier-30494 |
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Les cals peuvent aussi, après multiplication
en suffisance, être transplantés sur un milieu où
la balance cytokinines/auxines a été ménagée
pour provoquer la différenciation en tissus organisés. Ici
le feuillage apparaît et plusieurs vitroplants se développent
sur un même cal. C'est l'expérimentation qui permet de définir
la balance ad hoc entre les concentrations de substances de croissance.
Image bananier-dr-1242 |
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Les plantules sont donc nées de la re-différenciation
des cellules du cal. Elles sont isolées les unes des autres et
réinstallées sur un milieu de culture où la balance
(cytokinines/auxines) et d'autres conditions du milieu vont leur permettre
de se développer. Image bananier-14720 |
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Isolées les unes des autres, les plantules
acquièrent une autonomie permettant de prévoir leur sevrage.
Image bananier-1177 |
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Après avoir été bien individualisées
en laboratoire, après s'être développées à
suffisance, les plantules devront être sevrées du milieu
aseptisé du laboratoire et délicatement habituées
à un milieu plus naturel : c'est l'acclimatation. Image bananier-8890 |
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L'acclimatation conduit les plants du laboratoire
à la pépinière. En fin d'opération, sauf apparition
de vitrovariants, des plants de bananier identiques au plant-mère
sont obtenus. Les vitrovariants sont des vitroplants non conformes au
plant d'origine à cause de mutations ou d'anomalies. Il faut remarquer
que ces anomalies auraient été filtrées par le processus
de multiplication générative. Image bananier-30502 |
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L'acclimatation.conduit les plants du laboratoire
à la pépinière. La vitesse de multiplication par
micropropagation in vitro est très élevée. A partir
d'un seul rejet, mille plants et plus peuvent être obtenus, "prêts
à l'emploi" en une année. Image bananier-8892 |
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